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yy.vip易游-血浆凝血酶原时间测定(PT)标准知识解析及操作规程!

更新时间:2026-04-14点击次数:

  YYVIP易游·(中国有限公司)官方网站-在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入试剂。加入试剂后,采用波长为660nm的光照射样本。凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。从散射光光强度的测定,可以做出凝血曲线,通过Percentage Detection Method法求得凝血时间。

  凝血酶原时间(PT)测定是Quick于1935年创立的。在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶(人脑、兔脑、胎盘及肺组织等制品的浸出液)和钙离子,使凝血酶原变为凝血酶,后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。观察血浆凝固所需要的时间即凝血酶原时间。其凝固时间取决于凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅰ的水平。该试验是反映外源凝血系统最常用的筛选试验。

  (一)开机:开机前,先打开连机的打印机。按下机器右边的POWER按钮。开机后机器进行自检,当屏幕上边显示“Ready”时可以进行试验。

  (二)洗针:在主屏幕上选“Rinse Probe”,然后按下“Execute”进行洗针。

  (三)准备试剂:按照仪器试剂位置程序要求,把每一项的试剂准备好,放在相应的位置。(注:PT试剂的配制:在冻干粉试剂瓶中加入蒸馏水4ml,于37ºC温箱或水浴箱中放置30min)。

  (四)准备标本:将室内质控和离心好的样本放在相应的样本架上(一个架子可放10个样本),准备好放在进样器上。

  (五)准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子,查看反应杯是否够量,需及时添加。

  (六)输入试验项目:按下主菜单上的“Work List”键,在试验项目键点击PT,使PT键由“—”变为“O”。如有需要按屏幕下的“Repeat”键,仪器会自动重复十个样本的检测项目与第一个样本相同。屏幕右边的光标移动键,按下“NEXT”表示翻到下一个界面,按“↑”表示向上移动光标,“←或→”表示下一个界面试验项目。

  (七)输入样本号:按下“ID No.Entry”,按顺序输入样本的序号或病人的号。

  (八)开始检测:待一切准备工作就绪,按下仪器右上角“START”键,仪器开始工作。

  (九)查看结果:返回主屏幕,检测的项目如果由“◎”变为“●”表明此试验已经完成,然后按下“Stored Date”(储存结果)键,屏幕会换到结果显示界面,检测的结果会自动传输到此画面,如果查看反应趋势图,按下边第一个菜单“Graph”,查看凝集趋势、吸光度、结果等。

  (十)洗针:当做完一批标本以后,需要洗针,按下“Rinse Probe”,然后按下“Execute”进行洗针。

  (十一)关机:回到主屏幕下,在洗完针以后方可关机,切断电源,关闭打印机。

  1、外源凝血系统的因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纤维蛋白原减低,如先天性某因子缺乏症和低(无)纤维蛋白原血症,但均很少见,获得性的见于DIC、原发性纤溶、维生素K缺乏症、肝脏疾病等。

  1、一般认为以维持PT值在参考值的2倍左右(1.3—2.5倍)即25—30s,或PT R为1.3—1.5(最大不超过2)为宜。

  (一)采血时,首先应该确认病人姓名,并且将姓名和编号写在真空采血管的标签处。

  (二)尽可能保证每次采血都在同样的条件下进行,即病人处于休息状态,并且在早餐前采血。

  (三)凝血实验标本最好不与其它实验一起采集,否则由于标本的分配、分装等而使血液停留在针管的时间延长。

  (二)取血时,病人应松弛,环境温暖,防止静脉痉挛,止血带的压力应尽可能小,取血速度平稳顺利,防止产生气泡。

  (三)用定量为3毫升的一次性枸橼酸钠(0.11mol/L)真空采血管采血至指定刻度,取血完毕立即轻轻颠倒混均混合均匀,不要剧烈震荡,并避免产生气泡。

  (五)务必于采血后2小时内测定完毕,如不能完成试验,冷冻贮存少量血浆(0.5—1ml)(最好在-70℃,或者当贮存时间较短时,可以置于-20℃条件下),在实验前将血浆于37℃下快速融化。血浆用塑料试管存放,并用塑料吸管移取标本。

  许多的实验误差都来源于技术的错误。在实验技术、试剂、温度及PH值上很小的变化都会导致试验结果明显的变化。孵育时间与温度是凝血酶原时间测定时应严格控制的参数。血浆绝不能在37°C下放置10min。

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